原理：

粗纤维在很大程度上能评价食品和饲料的质量，因为，它能够代表未被动物消化的那部分，实际上，这部分残留物就是脱脂的样品经过稀释的强酸或强碱水解后的残留部分。但很多方法由于提取条件未统一，测定结果没有可比性；VELP设计的FIWE6纤维素含量测定仪，主要采用范氏（Van Soest）的洗涤纤维分析原理，测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF），作为一种纤维素的提取装置，使得纤维素的测定更容易满足分析的标准要求。

植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。中性洗涤纤维经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。

试剂的配制：

仪器：粗纤维测定仪、真空泵

中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C10H14O8Na2.2H2O，分析纯）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7.10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56 g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）；

1N硫酸：量取约27.87 ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；

酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤；

操作步骤

中性洗涤纤维测定：

准确称取1.0000g样品（通过18目筛，太细容易堵塞坩埚）和0.5g无水亚硫酸钠置于粗纤维测定仪配置的玻璃坩埚中。控制仪器左边的摇杆，将6个坩埚放在正确的位置（见图3、图4），向下拉动摇杆（图5）并将其固定，此时坩埚便能被牢固地固定住了。打开自来水，将出口流速控制在约2L/min。打开主开关（见7），显示灯变亮，通过电压调节器（见8）使热能控制在0-100%，将电压控制器的旋钮调到除OFF外的一个位置，如果自来水没打开或水流速小于2L/min，这时控制水流速的指示灯（见6）会变亮并且显示一个提示的光信号，这时就要打开或开大水流，以便消除此提醒。

仪器面板上的两个按钮UP和DOWN（见9），可以在显示屏上（见10）设置分析时间。当分析时间达到60min时，会出现系统提示信息。

在测定样品中纤维素含量时（如大豆粉），坩埚上的小孔起着非常大的作用，在坩埚中加入硅藻土粉（过滤助剂）后，对样品残渣冲洗时要通过坩埚上的小孔来进行。在称量之前，向每个坩埚中加入3-4mm的硅藻土以确定皮重。

3个或6个三向阀 主要起着如下功能：

u  关闭：在坩埚中的样品需要加热时；

u  供压：向坩埚底部的玻璃试管提供压力，以便对其中的样品进行搅拌

u  提供真空：连接到真空装置上以便试剂及清洗水的排放。

说明：    1  6个坩埚的高度差要控制在±0.2mm的范围内；

          2  提供3-6个坩埚备用，但若是新的坩埚，必须要在500℃的马弗炉中灼烧1h；

             3  建议在更换时，要选择一整套完整的坩埚，最好选择VELP公司原装的配套坩

                埚；

4  固定在导杆上的插口处（见15）有两个螺丝，当坩埚中的试剂溢出时，可以

通过六角扳手松开或者拧紧螺丝对坩埚的松紧度进行调节。

由消煮管上方的加液口通过小漏斗加入100ml中性洗涤剂和数滴十氢化萘。打开消煮开关，调消煮电压到最大，在5~10min内煮沸，然后调整消煮调压到150-170v，使持续保持微沸，向上打开消煮定时开关，设定为60min。60分钟消煮时间到，则峰鸣器呜叫，同时自动切断消煮加热电源。煮沸完毕后，将消煮开关关闭，将电压调到最小。打开抽滤泵开关，将中性洗涤液抽掉。抽完中性洗涤液后，先关闭抽滤泵开关，再关闭抽滤开关。打开蒸馏水开关，用沸水反复冲洗和抽滤玻璃坩埚，连续2-3次， 直洗至滤液呈中性为止。从上面加液口加20 ml丙酮冲洗二次，抽滤。在抽滤过程中，若出现坩埚堵塞，可关闭抽滤泵，开启反冲泵用气流反击，直至出现气泡后关闭反冲泵，打开抽滤泵继续抽滤，洗涤完毕后，关闭所有抽滤开关及泵开关。

将玻璃坩埚置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷却30 min称重，直称至恒重，相差不超过0.1mg时，可认为干燥至恒重。（样品接着可以做酸性洗涤纤维）。

酸性洗涤纤维测定：

准确称取1g样品（通过40目筛）置于纤维测定仪配置的玻璃坩埚中（或者直接使用测定完中性洗涤纤维的样品），由消煮管上方的加液口通过小漏斗加入100ml酸性洗涤剂和数滴十氢化萘。（操作规程同中性洗涤纤维）打开冷凝装置和消煮开关，调消煮电压到最大，在5~10min内煮沸，然后调整消煮调压到150-170v，使持续保持微沸，向上打开消煮定时开关，设定为60min。60分钟消煮时间到，则峰鸣器呜叫，同时自动切断消煮加热电源。煮沸完毕后，将消煮开关关闭，将电压调到最小。打开1-6号抽滤开关（也可单独一个一个抽），再打开抽滤泵开关，将酸性洗涤液抽掉。抽完酸性洗涤液后，先关闭抽滤泵开关，再关闭抽滤开关。打开蒸馏水开关，用沸水反复冲洗和抽滤玻璃坩埚，连续2-3次， 直洗至滤液呈中性为止。从上面加液口加少量丙酮冲洗，至抽小的丙酮呈无色为止，抽净丙酮。在抽滤过程中，若出现坩埚堵塞，可关闭抽滤泵，开启反冲泵用气流反击，直至出现气泡后关闭反冲泵，打开抽滤泵继续抽滤，洗涤完毕后，关闭所有抽滤开关及泵开关。

将玻璃坩埚置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷却30 min称重，直称至恒重。

中性洗涤纤维含量的计算：NDF（%）=（W1－W2）/ W×100

式中： W1—玻璃坩埚和NDF重（g） W2—玻璃坩埚重（g）

W—试样重（g）

酸性洗涤纤维含量的计算：ADF（%）=（G1－G2）/W×100

式中：     G1—玻璃坩埚和ADF重（g） G2—玻璃坩埚重（g）

W—试样重（g）

其他指标计算：

酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA）测定：

将酸性洗涤纤维加入72%硫酸，在20℃消化3h后过滤，并冲洗至中性。消化过程中溶解部分为纤维素，不溶解的残渣为酸性洗涤木质素和酸不溶灰分，将残渣烘干并灼烧灰化后即可得出酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量。

结果计算：

半纤维素含量的计算：半纤维素（%）=NDF（%）－ADF（%）

纤维素含量的计算：纤维素=ADF（%）－经72%硫酸处理后的残渣（%）

酸性洗涤木质素（ADL）含量的计算：ADL（%）=残渣（%）－灰分